ELISPOT檢測中運用兩種抗原PK混合抗原，誰更勝一籌？

γ-干擾素釋放試驗（IGRA）是近年來潛伏結(jié)核感染和結(jié)核病診斷中應(yīng)用越來越廣泛的技術(shù)。其主要原理是受到結(jié)核分枝桿菌抗原刺激而致敏的T細(xì)胞再次遇到同類抗原時可產(chǎn)生γ-干擾素，通過檢測γ-干擾素的含量或分泌γ-干擾素的T細(xì)胞的數(shù)量來判斷機體是否感染結(jié)核分枝桿菌。

基于IGRA原理的方法中，又以酶聯(lián)免疫斑點法（ELISPOT）占國內(nèi)主導(dǎo)地位。它結(jié)合了細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與ELISA技術(shù)，并選用致病性結(jié)核分枝桿菌特有的早期分泌性抗原靶蛋白6（ESAT-6）和培養(yǎng)濾過蛋白10（CFP10）兩種抗原進(jìn)行特異性刺激，能夠在單細(xì)胞水平定量檢測分泌γ-干擾素的T細(xì)胞的數(shù)量，大大提高了反應(yīng)的敏感度和特異度。

ELISPOT檢測中所使用的抗原ESAT-6和CFP10雖然都是致病結(jié)核分枝桿菌特有的兩種抗原，且具有相同的菌種分布，但二者之間也存在一定的差異。有研究指出，ESAT-6存在于結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)物濾液和細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞壁中，而CFP10主要在培養(yǎng)濾過液、細(xì)胞質(zhì)和膜碎片中存在，二者對細(xì)胞的刺激機制可能不完全相同。另外，這兩種蛋白都屬于低分子量的分泌蛋白，具有很強的細(xì)胞免疫活性，融合后可能會因為蛋白分子量的增加致使細(xì)胞免疫活性下降。也可能由于這種融合蛋白中ESAT-6和CFP10的空間結(jié)構(gòu)相互影響，致使其特定的抗原決定簇被屏蔽[，從而導(dǎo)致蛋白活性受到影響。而將抗原ESAT-6和CFP10分開進(jìn)行檢測，能夠有效地避免這一現(xiàn)象導(dǎo)致的蛋白活性降低的問題。

從檢測對象來說，不同個體的T細(xì)胞系對重組的ESAT-6和CFP10的免疫反應(yīng)各異。因此，選取這兩種特異性蛋白分別刺激患者，有助于研究不同蛋白對不同結(jié)核病患者產(chǎn)生的不同免疫反應(yīng)。

綜上所述，ESAT-6和CFP10在ELISPOT檢測中分開，分別刺激檢測具有多種操作優(yōu)勢：

1、檢測敏感度和特異度有較大程度提高；

2、抗原決定簇暴露更徹底，具有更強細(xì)胞免疫活性；

3、大幅度提高臨床診斷的準(zhǔn)確性。　

博賽生物TB-SPOT試劑研發(fā)基于以上原理，并且與進(jìn)口T-SPOT·TB試劑相比，從研發(fā)、操作、結(jié)果判定、臨床診斷上均具有較高的一致性，具有良好的檢測效能。

產(chǎn)品具備以下特點：

     取樣方便：無取樣局限性；

     敏感度好：不受個體免疫力影響，可達(dá)90%以上；

     特異度高：與卡介苗和NTM無交叉，可達(dá)90%以上；

     安全快捷：體外檢測，24小時出結(jié)果；

     成本可控：低于進(jìn)口同類試劑；

     兩種抗原分開檢測！